虎皮鸚鵡沙門氏菌的診斷(共5張圖片)
  • 1月前发布

  沙門氏菌病是由沙門氏菌引起的以敗血症、腸炎為主的疾病。由於可以感染人、多種家畜以及野生動物,在公共衛生學上具有重要的研究地位。2015年6月,我院接收一例虎皮鸚鵡突然拉血便死亡的病例,通過沙門氏菌PCR快速鑒定為沙門氏菌感染。

虎皮鸚鵡沙門氏菌的診斷
死亡鸚鵡解剖前

虎皮鸚鵡沙門氏菌的診斷
死亡鸚鵡解剖前

  1 發病死亡過程

  寵主來院要求鑒定該鸚鵡死亡原因,描述該虎皮鸚鵡突然死亡,肉眼觀察該鸚鵡僅肛門處有大量血便。解剖觀察,肝臟質地脆、有片狀黃色壞死灶;胰腺輕微出血;腎臟較脆;十二指腸後端及盲腸出血嚴重;其餘臟器正常。寄生蟲檢查排除球蟲。

虎皮鸚鵡沙門氏菌的診斷
大量血便

  2 細菌分離

  無菌採集病死鸚鵡的肝、脾等組織接種於血平皿,37℃培養18~24h後觀察。從肝臟中分離出溶血小菌落,接種至麥康凱平皿上長出無色透明菌落,接種至亞硫酸鉍平板上長處帶金屬光澤的黑色菌落。經革蘭氏染色,該菌為陰性桿菌,初步判斷為沙門氏菌。

虎皮鸚鵡沙門氏菌的診斷
病死印務剖檢圖

  3 PCR鑒定

  3.1 細菌DNA攝取

  細菌DNA提取採用熱裂解法,即將各取150μl檢測菌液、沙門氏菌標準株菌液和水(陰性對照)於離心管中,100℃煮沸10min後,12000r/min離心10min,取上清液為DNA模板。

  3.2 PCR反應

  檢測沙門氏菌的特異性PCR引物為P1:5『-ACTGGCGTTATCCCTTTCTCTGGTG-3』,P2:5『-ATGTTGTCCTGCCCCTGGTAAGAGA-3』。

  3.3 電泳分析

  取5μlPCR產物直接經1%瓊脂凝膠(含0.5μg/ml溴化乙錠)電泳,在凝膠成像儀中觀察結果並拍照。檢測菌樣出現沙門氏菌特異性條帶為587bp,表面該菌為沙門氏菌。

虎皮鸚鵡沙門氏菌的診斷
電泳分析結果

  4 藥敏試驗

  以為K-B法進行藥物敏感試驗。該菌接種於血平板,貼上藥敏紙片,37℃培養24h,觀察結果。本菌對慶大、丁胺卡那、氟苯尼考、諾氟沙星敏感。對先鋒黴素、青黴素G鈉、頭孢曲松、氟哌酸、痢特靈、阿莫西林等耐藥。

  5 鸚鵡沙門氏菌的防治

  5.1 鸚鵡沙門氏菌病的治療

  OP 諾氟沙星每,10-20毫克/千克體重,分3次口服。

  鏈黴素,每日100到200毫克/千克體重,分2-3次口服。

  5.2 鸚鵡沙門氏菌病的預防

  (1)帶菌鳥和健康鳥隔離飼養。一定不能用康復鳥做種鳥。

  (2)鳥籠鳥捨鳥窩要經常消毒。可用0。1%的過氧乙酸噴霧消毒,也可用5%漂白粉或84消毒液或5%的火鹼對鳥籠周圍環境消毒。

  (3)雛鳥開食後預防用藥,用夫喃唑酮每日10毫克/千克體重,分3-4次口服,連用3天,連續使用不得超過五天,以免發生中毒。

  6 討論

  6.1 國內有報到沙門氏菌感染各種珍稀珍禽,並引起較大經濟損失。本次鸚鵡死亡迅速,臨床僅僅出現血便,而從肝臟分離出沙門氏菌,說明該菌已造成全身敗血症、嚴重的腸炎,符合該病臨床症狀。

  6.2 感染沙門氏菌的症狀為:幼鳥嗜睡,食慾消失,胎毛蓬亂,喜躲在昏暗處,縮頸,眼半閉,翅膀下垂,呆立不動,腹瀉。糞便初呈乳糜樣,以後變為白色,肛門周圍胎毛常沾有糞便,有時見肛門被糞便堵住,肛門沾滿糞便的病雛鳥在排便時常發出尖銳嗚叫聲。此外常常體溫升高,呼吸困難,大多數死亡。此外,依禽種的不同,也有較典型的病症。如灰鸚容易有關節炎,肉芽腫皮膚炎,蜂窩織炎,腱鞘炎等慢性病變。吸蜜鸚鵡則有較高的死亡率。小鸚鵡、金絲雀(詳情介紹)易有眼睛症狀。

  在傳統的沙門氏菌鑒定方法中,常規鑒別培養基分離和生化鑒定程序複雜、時間較長;全自動細菌鑒定儀鑒定成本較高、操作複雜;沙門氏菌A~F多價0抗原檢測會因該菌發生S-T-R變異,喪失了正常的0抗原,而不能被血清凝集或出現自凝現象,造成假陰性。本次採用PCR方法對沙門氏菌組氨酸轉運操縱子基因序列進行擴增,具有特異、快速、簡便、靈敏等的優點。因為檢測細菌的核酸,所以該方法有著準確性較高的優點。雖然該方法在家畜、家禽等臨床上已經廣泛應用,但這是首次運用在鸚鵡沙門氏菌病的檢測中。

  目前沙門氏菌的耐藥性引起了極大的關注。其產生耐藥性的機制較多,如產生滅活酶和鈍化酶、改變藥物作用靶位點、通過生物膜產生耐藥性、外排泵產生耐藥性、甲基錯配修復系統突變、可移動基因元件接到耐藥及耐藥基因的散播等。因此,藥敏實驗對該病的治療具有指導作用,避免盲目用藥、產生耐藥性。本菌的耐藥譜相對較窄,給用藥提供了較多的選擇性。

  沙門氏菌廣泛存在於自然卷中,尤其在污水、土壤、感染動物的排泄物中。無錫的6、7月正值梅雨季節,加之寵主剛從外地買入該鸚鵡不久,其免疫力有所下降。因此快速分離鑒定細菌,同時結合藥敏實驗結果,合理的預防性用藥,及時進行籠捨消毒,是避免鳥類發病的關鍵。

THE END
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